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巨噬細胞清除ClodronateLiposomes

更新時間:2025-04-15

簡要描述:

巨噬細胞清除ClodronateLiposomes:氯膦酸二鈉脂質(zhì)體,用于小鼠等實驗動物體內(nèi)或者體外清除單核巨噬細胞。ClodronateLiposomes巨噬細胞清除試劑是研究單核巨噬細胞的重要方法。

巨噬細胞清除ClodronateLiposomes氯膦酸二鈉脂質(zhì)體巨噬細胞清除劑

品牌LIPOSOMA貨號C-005
規(guī)格5ml供貨周期現(xiàn)貨
主要用途

ClodronateLiposomes(氯膦酸二鈉脂質(zhì)體)

應(yīng)用領(lǐng)域生物科研,醫(yī)學(xué)研究,

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產(chǎn)品簡介:

清除巨噬細胞(depletion of macrophages)是研究巨噬細胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開發(fā)的一款Clodronate Liposomes,可以利用巨噬細胞的內(nèi)吞機制,將脂質(zhì)體包裹的膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細胞內(nèi),利用“特洛伊木馬機制"從而達到去除巨噬細胞的目的。

作用原理:

兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過程中被包裹進磷脂雙分子層之間的水相中(如圖1)。游離的氯磷酸鹽不能自由的通過脂質(zhì)體的磷脂雙分子層。隨著脂質(zhì)體被巨噬細胞吞噬,在巨噬細胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來,并累積在細胞內(nèi),當(dāng)其達到一定濃度時,巨噬細胞將會受到不可逆轉(zhuǎn)的損傷,從而進入凋亡過程。從死亡的巨噬細胞中釋放出來的氯磷酸鹽在細胞外的半衰期極短(大約15min),可以通過泌尿系統(tǒng)排除體外。

CLODRONATE LIPOSOMES

氯膦酸鹽脂質(zhì)體

SKU: C-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質(zhì)體C-005構(gòu)成:

氯膦酸鹽脂質(zhì)體:

由同心磷脂雙層構(gòu)成的人造球,該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖液)水溶液。脂質(zhì)體是顆粒,大小大。3微米。它們在PBS中形成懸浮液,在儲存時會沉淀,在試管或燒瓶的底部形成沉淀。在對實驗動物給藥之前,應(yīng)先搖晃懸浮液,以回收均勻的懸浮液。

對照脂質(zhì)體(PBS):

對照脂質(zhì)體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS,可用于對照實驗,以查明注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質(zhì)體C-005產(chǎn)品描述

磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成。將所有脂質(zhì)體制劑懸浮在無菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中:

– 10 mM的Na2HPO4;

– 10毫米NaH2PO4;

– 140毫米氯化鈉。


我們所有的脂質(zhì)體均帶負電荷,因此不會一起阻塞。懸浮液中的脂質(zhì)體沒有大小,這意味著它也包含越來越大的脂質(zhì)體(大3微米)。平均而言,脂質(zhì)體的大小為1.7微米。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質(zhì)體囊泡中。

PBS脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽,可用于對照實驗。

熒光DiI脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包封了PBS水溶液,并用熒光染料DiI標(biāo)記。它們不含氯膦酸鹽,可用于研究通過特定給藥途徑注射的脂質(zhì)體是否能夠到達要研究的巨噬細胞。


儲存和使用說明

到達脂質(zhì)體后,應(yīng)將其儲存在4 – 8oC(或39 – 47oF)之間。脂質(zhì)體懸浮液不得冷凍,也不要暴露于高溫下。這可能會對磷脂雙層造成干擾,可能導(dǎo)致氯膦酸鹽從脂質(zhì)體中泄漏出來。

給藥前,首先使脂質(zhì)體達到室溫,然后輕輕搖動或攪拌懸浮液。一段時間后,脂質(zhì)體易于沉淀,導(dǎo)致小瓶中的分布不均勻。當(dāng)注射花費太多時間時,脂質(zhì)體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動物,可能會導(dǎo)致劑量不同。

不建議稀釋懸浮液,但如有必要,請使用PBS或鹽水。

我們建議客戶在發(fā)貨后16周內(nèi)使用脂質(zhì)體制劑。強烈建議不要在到期日期之后使用。在此期間之后,污染的風(fēng)險會增加,并且可能會發(fā)生輕微的功能喪失。

作用機理

巨噬細胞在免疫和非免疫防御機制中起重要作用。它們是抵御滲透到脊椎動物體內(nèi)的細菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防線。巨噬細胞是大型細胞,幾乎存在于所有身體組織中,它們可以具有不同的形式和名稱(例如庫普弗細胞,肺泡巨噬細胞,小膠質(zhì)細胞,破骨細胞,紅髓巨噬細胞)。巨噬細胞“清除",它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物,微生物,癌細胞和細胞碎片。該過程稱為吞噬作用。巨噬細胞主要通過可溶性分子如細胞因子和趨化因子的介導(dǎo)來進一步調(diào)節(jié)許多非吞噬細胞的功能。他們參與先天免疫,

脂質(zhì)體是人工制備的球體,由同心磷脂雙層組成。當(dāng)磷脂分散在水中時,親水性頭部將構(gòu)成脂質(zhì)體的兩個外部部分,而疏水性脂肪酸基團將構(gòu)成內(nèi)部部分(見圖1)。水室分隔雙層,親水分子可以溶解在其中,形成脂質(zhì)體包封的分子。氯膦酸鹽(二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP)是一種親水性分子,可以封裝在磷脂雙層中。游離氯膦酸鹽不易穿過細胞膜,并通過腎臟系統(tǒng)從循環(huán)中迅速清除(即數(shù)分鐘內(nèi))。但是,氯膦酸鹽脂質(zhì)體包埋在脂質(zhì)體中時,會被巨噬細胞吞噬,無法逃脫(見圖2)。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化,而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細胞中。巨噬細胞攝入的磷脂雙層和脂質(zhì)體越多,在巨噬細胞內(nèi)積累的氯膦酸鹽越多。超過一定的細胞內(nèi)濃度,氯膦酸鹽將通過啟動程序性細胞死亡(即凋亡)來消除巨噬細胞。

機制氯膦酸鹽脂質(zhì)體

圖1.氯膦酸鹽脂質(zhì)體的示意圖。囊泡由同心的磷脂雙層構(gòu)成,被水性隔室隔開。雙層由親水和疏水基團組成。將氯膦酸鹽(在此以黑色方塊表示)溶解在水溶液中并封裝在脂質(zhì)體內(nèi)。


氯膦酸鹽脂質(zhì)體通過巨噬細胞攝取和消化的示意圖。

圖2.巨噬細胞對氯膦酸鹽脂質(zhì)體的攝取和消化示意圖。巨噬細胞通過胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質(zhì)體,然后與含有磷脂酶的溶酶體(L)融合(箭頭)。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多,在巨噬細胞內(nèi)釋放的氯膦酸鹽(黑色方塊)越多。巨噬細胞終通過凋亡被殺死。(N =巨噬細胞核)。

因此,氯膦酸鹽脂質(zhì)體可用于通過消耗巨噬細胞來研究巨噬細胞功能。例如,它們可以應(yīng)用于各種自身免疫性疾病,移植,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質(zhì)體只有在可以達到的情況下才能耗盡巨噬細胞。一些組織可以形成脂質(zhì)體的屏障。通過選擇氯膦酸鹽脂質(zhì)體的正確給藥途徑,可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細胞。有關(guān)管理協(xié)議的更多信息,請單擊此處。


PBS脂質(zhì)體主要用于對照實驗。但是,這些也可以在某些時間段內(nèi)通過飽和來阻止吞噬作用。因此,PBS脂質(zhì)體不能代表正常健康的,未阻斷的,未抑制的和未活化的巨噬細胞的對照實驗。當(dāng)比較氯膦酸鹽脂質(zhì)體和PBS脂質(zhì)體的作用時,其作用因此可能小于預(yù)期。

有關(guān)更多信息,請參見:

– Van Rooijen,N.和Sanders,A.(1994)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的巨噬細胞耗竭:作用機理,脂質(zhì)體制備和應(yīng)用。免疫學(xué)雜志,174(1-2),83-93。

– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的氯膦酸鹽和丙am的細胞內(nèi)遞送誘導(dǎo)的巨噬細胞凋亡。免疫學(xué)雜志,193(1),93-99。


巨噬細胞清除ClodronateLiposomes氯膦酸二鈉脂質(zhì)體巨噬細胞清除劑

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